2、 實驗

2.1、材料

2.1.1、表面活性劑和洗滌劑

本研究使用了七種表面活性劑和三種商用洗滌劑。 這七種表面活性劑是：LAS（用于JIS洗衣粉試驗的直鏈烷基苯磺酸鈉，WAKO Chemical Co.）、AS（用于生物化學的十二烷基硫酸鈉，WAKO Chemical Co.）、AES（乙醇乙氧基硫酸鹽，TAYCA Co.，EO:3）、AE8（乙醇乙氧基酯，EO:8，日本SHOKUBAI Co.）、AE12（乙醇乙氧基酯，EO:12，日本SHOKUBAI Co.）、LB （酒精EO/PO嵌段共聚物，EO:8，PO:3，朝日電器株式會社）和肥皂（用于洗衣的商業產品，標簽脂肪酸鈉純度：99%以上） 。這些表面活性劑的純度均基于產品文件或標簽。三種商用洗滌劑被命名為Det-1、Det-2和Det-3。Det-1為粉末型洗滌劑，表面活性劑成分為AES、AE和K-皂。Det-2也是粉末型洗滌劑，但主要由NaSOAP和K-皂組成，含有微量AE Det-3是一種液體型洗滌劑，含有AE和脂肪酸乙醇胺作為表面活性劑。

2.1.2、試驗用水

通過在1L蒸餾水中溶解26.1mg CaCl2＠2H2O、17.7mg MgSO4＠7H2O、1.1mg K2SO4和25mg NaHCO3制備標準試驗水。該試驗水作為CaCO3的水硬度為25ppm。為了測試水硬度成分對毒性試驗的影響，制備了另一種僅含有CaCl2＠2H2O的試驗水 紅色。該試驗水的水硬度為CaCO3，也為25 ppm。在本文中，前一試驗水命名為“4-鹽混合水”，后一試驗水命名為“CaCl2水”。

2.2、水生毒性試驗

2.2.1、野生稻

野生稻是在水族館商店購買的，在毒性試驗前，在100 L容量的容器中飼養7天以上，容器中充滿4-鹽混合水。水溫保持在20℃，明暗頻率保持在16小時/8小時的比例。喂食頻率為每天一次。

毒性試驗符合JIS K0102（1998）的要求 指南，其中規定了使用71種魚類對工業廢水進行水生毒性試驗的方法。將5 L試驗容器裝滿4-鹽混合水和試驗表面活性劑溶液。用小浸網捕獲10條魚，稱重、測量并轉移到5 L試驗容器中。測量試驗水的溶解氧和pH值 每天一次，在24、48、72和96小時后計算活的和死的個體數量。通過繪制96小時后的死亡率來確定半數致死濃度（LC50）。

2.2.2、大型水蚤

大型水蚤是在脫氯自來水中，水溫為18-22℃，以小球藻（小球藻工業公司V12）為飼料培育而成，用最近24小時內出生的幼蟲進行毒性試驗。

毒性試驗符合JIS K0229（1992），“測定化學品對水蚤移動抑制的試驗方法” 。首先，將9.5 mL試驗水和試驗表面活性劑樣品倒入20 mL容量玻璃試管中。然后使用巴斯德移液管將5種試驗生物體轉移到試管中，并將蒸餾水添加到10 mL標記線中。在每種條件下使用4個試管樣品。通過固定化的圖形繪制確定EC50 24小時后，與表面活性劑濃度相對應的反應速率。

2.2.3、哈塔家族

在稻谷中捕獲足爪螨，并在實驗室用脫氯自來水在18-22℃的水溫下繁殖。使用四胺（Tetra Co.）作為飼料。選擇0.5-0.8 mm的生物體，使用0.5 mm網眼和0.8 mm網眼進行毒性試驗。

將50 mL試驗水和試驗表面活性劑樣品倒入50 mL燒杯中。使用巴斯德吸管將10個試驗生物體轉移到燒杯中。每種情況下使用2個試驗燒杯樣品。24小時后，通過使用400 mm CCD顯微鏡觀察內臟運動來計數活的和死的個體數量 放大倍數：LC50通過死亡率的圖解法測定。

2.3、表面張力測量

EZ-Pi（基布朗公司）用于測量試驗液體的表面張力。該儀器是一種自動表面張力計，采用威廉平衡法，帶有鉑絲探針。液體溫度控制在20-22℃，測量前試驗液體靜置20分鐘以上。每種條件下重復測量6次打開，并使用平均值。

本文將表面活性劑溶液在急性水生毒性（LC50或EC50）出現點的表面張力值命名為“γtox”。

2.4、泥漿土添加量的評價

通過在表面活性劑溶液中加入泥土，研究了吸附劑存在對表面活性劑溶液表面張力或水毒性的影響。一般土壤樣品取自橫濱國家公園。大學校園。樣品通過1.0 mm篩孔，并在80℃下干燥2 h。使用玻璃管攪拌器將0.75 g土壤樣品與10 mL表面活性劑溶液在玻璃管中混合。靜置約30分鐘后，測量表面張力并進行毒性試驗。忽略了與大型水蚤一起倒出的微量標準水（<0.1 mL）。

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應對于水生生物毒性的影響——摘要、導言

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應對于水生生物毒性的影響——實驗

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應對于水生生物毒性的影響——結果和討論

表面活性劑的生物毒性以及水的硬度和吸附效應對于水生生物毒性的影響——結論、致謝！