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香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質(zhì)——材料和方法
來源:上海謂載 瀏覽 902 次 發(fā)布時間:2021-11-01
二、材料和方法
2.1. 材料
香豆素 (99% 純度), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphorac-(1-glycerol), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanola 我的和 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine(所有 純度 > 99% 的磷脂)購自 Sigma– 奧爾德里奇(美國圣路易斯)。 超純水 (18.2 ΩX.cm-1 次方) 是 從 Synergy Milli-Q 系統(tǒng) (Billerica, USA) 獲得。
2.2.π-A 和 ?VA 等溫線
CMR 和脂質(zhì)溶液在氯仿中制備,濃度為 1 mg.mL-1。 隨后,CMR/的不同解決方案 不同摩爾比的脂質(zhì) (XCMR = 0, 0.250, 0.375, 0.500, 0.675, 獲得了 0.750、0.875 和 1)。 然后,這些餾分的 10 mL 均勻地沉積在檸檬酸鹽(檸檬酸)-磷酸鹽上 (磷酸鈉) 緩沖液 (pH 7.4 和離子強(qiáng)度 10-3 次方 M) 亞相 (v = 20 毫升) 使用漢密爾頓微移液器。 實(shí)驗(yàn) 在恒定的對稱壓縮下進(jìn)行 速度15mm.min-1次方(溫度23±0.2圈),等待后 15 分鐘以確保溶劑蒸發(fā)。 等溫線在 Kibron Langmuir 槽(Microtrough XS,Helsinki, 芬蘭)。 表面壓力測量精度為 ±0.01 mN.m-1次方 . 通過振動測量表面電位 板法(Microspot,Kibron,赫爾辛基,芬蘭),精度為 ±0.1 mV。π-A 和 ΔVA 等溫線重復(fù)三次,標(biāo)準(zhǔn)偏差約為 5%,使用至少三個 不同的解決方案。
2.3. LB薄膜的形態(tài)分析
純單層和混合單層被壓縮并保持在 p = 20 mN.m-1 次方的目標(biāo)壓力下 . 隨后,Langmuir 薄膜被轉(zhuǎn)移到新切割的云母上,浸漬 基板以 2 mm.min-1 次方的恒定速率以控制 單層的形成。 所有測量均使用 SPM 9700 原子力顯微鏡(Shimadzu 儀器有限公司,日本)在非接觸模式。 懸臂與 一個硅原子力顯微鏡探頭(Nanoworld,日本,共振頻率 = 300 kHz,彈簧常數(shù) = 42 Nm-1次方 ) 被使用。 圖片 (512 每行點(diǎn))以 1.0 Hz 的掃描速率在一次掃描中收集 面積 5.0 ? 5.0 mm 在每個樣品的四個不同區(qū)域上的至少兩個不同樣品上此外,還獲得了圖像 并使用 AFM Gwyddion 軟件 (Necas, 2008) 進(jìn)行分析。
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